人干扰素诱导蛋白44Elisa试剂盒说明书

　　人干扰素诱导蛋白44(IFI44)Elisa试剂盒。本说明书将为您提供详细的使用指南，以确保您能够准确、有效地进行实验操作。请您在使用前仔细阅读，并按照步骤进行操作。

　　一、产品概述 本试剂盒采用双抗原夹心法测定标本中人干扰素诱导蛋白44(IFI44)的水平。通过纯化的抗原包被微孔板，制成固相抗原，与待测样品中的人干扰素诱导蛋白44结合，再与HRP标记的抗原结合，形成抗原-抗体-酶标抗原复合物。经过洗涤后，加入底物TMB显色，以测定样品中IFI44的含量。

　　二、实验准备

　　1. 请确保实验环境清洁，避免污染。

　　2. 将试剂盒及所需试剂置于室温下平衡30分钟。

　　3. 准备实验所需的加样器、移液管、试管等器材，并确保其清洁干燥。

　　三、操作步骤

　　1. 加样：按照实验设计，分别设置空白孔、标准孔和待测样品孔。在酶标包被板上准确加样50μl标准品，待测样品孔中先加入40μl样品稀释液，再加入10μl待测样品(样品最终稀释度为5倍)。加样时请注意，样品应加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

　　2. 温育：用封板膜封板后，将酶标板置于37℃恒温箱中温育30分钟。

　　3. 配液：将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水稀释20倍，备用。

　　4. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干。每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

　　5. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

　　6. 再次温育：同步骤2。

　　7. 再次洗涤：同步骤4。

　　8. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，置37℃避光显色15分钟。

　　9. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应(此时蓝色立转黄色)。

　　10. 测定：在加终止液后15分钟以内，使用酶标仪在450nm波长下测定各孔的光密度(OD值)。

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