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elisa实验:引起酶免反应显色淡,灵敏度偏低的原因
引起酶免反应显色淡、灵敏度偏低有很多种因素,下面BUNSEN九游服务小编给大家介绍几种可能的较常见的原因:
1. 试剂盒在运输途中时间太长,温度太高;要求运输时置于保温箱内运输,并放足够数量的冰块,尽量缩短运输时间。
2. 试剂盒超过有效期;建议不要使用超过效期的试剂盒。
3. 试剂、样品使用前未能平衡;建议使用前于室温平衡30分钟左右。
4. 试剂开启时间过长,长菌;建议试剂开启后应该于半个月内用完。
5. 移液器吸量不足,移液抽吸排放太快,吸头内壁挂液太多或内壁不清洁。建议使用一次性的吸头。
6. 恒温箱温度不足37℃ (或水浴锅温度不足37℃);建议孵育反应期间应该控制好温度。
7. 孵育反应时间不足;建议应准确记时。
8. 洗涤时冲击力太大,洗涤液浸泡时间太长,洗涤次数增加。建议减少洗涤冲击力,按说明书要求的时间,准确记录洗涤时间。
9. 显色剂滴加量不足或顺序颠倒,或混合后加入;建议应该先加显色剂A,后加显色剂B,不可将A、B液混合后加入。
10. 显色剂反应时间不足;建议准确记时。
11. 蒸馏水水质有问题;建议检查蒸馏水。
12. 样品用叠氮钠防腐,抑制了酶的反应;建议不能加叠氮钠防腐。
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