天津九游服务带您了解细胞冻存的具体步骤!

　　细胞冻存是将细胞放在低温环境，减少细胞代谢，以便长期储存的一种技术。细胞冻存是细胞保存的主要方法之一，起到了细胞保种的作用。下面看下BUNSEN九游服务小编的详解：

　　1、配制含10%DMSO或甘油、10～20%小牛血清的冻存培养液;

　　2、取对数生长期的细胞，去除旧培养液，用PBS清洗。

　　3、去除PBS，加入适量胰蛋白酶(覆盖培养皿表面)把单层生长的细胞消化下来;

　　4、离心1000rpm，5min;

　　5、去除胰蛋白酶，加入适量配制好的冻存培养液，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，计数，调节冻存液中细胞的最终密度为5×106/ml～1×107/ml;

　　6、将细胞分装入冻存管中，每管1～1.5 ml;

　　7、在细胞冻存管上标明细胞的名称，冻存时间及操作者;

　　8、冻存：标准的冻存程序为降温速率-1～-2℃/ min;当温度达-25℃以下时，可增至-5℃～-10℃/min;到-100℃时，则可迅速浸入液氮中。也可将装有细胞的冻存管放入-20℃冰箱2h ，然后放入-70℃冰箱中过夜，取出冻存管，移入液氮容器内。

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